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WAKO的產(chǎn)品介紹

發(fā)布時間： 2024-12-03　　點擊次數(shù)： 105次
CEPT是美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）開發(fā)的小分子混合物。由4種成分組成，并取其組成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的開頭字母命名為“CEPT"。


研究表明，CEPT可防止人ES/iPS細胞（人多能干細胞：hPSCs）在細胞傳代中的細胞應(yīng)激和DNA損傷1）。與強效ROCK抑制劑Y-27632相似，可提高細胞傳代和凍存時hPSCs的存活率。

此外，與基于hPSCs的胚狀體和類器官形成、單細胞克隆和基因編輯等干細胞研究中所用的現(xiàn)有培養(yǎng)方法相比，CEPT還可改善細胞存活率1,2,3）。

FUJIFILM Wako已上線經(jīng)無菌測試且無需制備的即用型CEPT Cocktail溶液。本產(chǎn)品為經(jīng)過濾器滅菌的溶液，可直接添加至培養(yǎng)基使用。有助于再生醫(yī)療研究。

參考文獻
1）Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021).
2）Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16, 3076 (2021).
3）Tristan, C.A. et al. : Nat.Protoc., 18, 48 (2022).

WAKO的產(chǎn)品介紹

◆特點
● 從DNA損傷等細胞應(yīng)激中保護ES/iPS細胞，維持細胞結(jié)構(gòu)與功能
● 已進行過濾滅菌的即用型混合溶液
● 已通過內(nèi)毒素測試以及支原體陰性檢測的CultureSure系列

◆測試項目
● 濃度（HPLC）：已通過測試
● 外觀：液體
● 內(nèi)毒素：<3 EU/mL
● 已完成無菌測試
● 已完成支原體陰性測試

◆使用方法
以1/1,000的量添加本品至培養(yǎng)基，充分混合后使用。
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※使用注意
● 本產(chǎn)品為凍存品（-20°C）。為避免反復(fù)凍融，建議根據(jù)使用量分裝凍存。
● 溶解時可能會出現(xiàn)沉淀，并非產(chǎn)品質(zhì)量問題，請直接使用。（沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會溶解，請避免反復(fù)冷凍和加熱。）
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◆適用范圍
樣品：人ES/iPS細胞
應(yīng)用：
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◆性能數(shù)據(jù)
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®   hPSC Δ培養(yǎng)基，在37°C，5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。

培養(yǎng)經(jīng)過16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基，每2~3天更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)第8天時，確認(rèn)細胞后，使用4%多聚甲醛固定細胞，ALP染色后，計數(shù)細胞集落。
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單細胞克隆測試
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培養(yǎng)基，在37°C，5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細胞201B7株（96孔板）。

培養(yǎng)經(jīng)過16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基，每2~3天更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)第13天時，確認(rèn)細胞后，使用4%多聚甲醛固定細胞，ALP染色后，計數(shù)形成細胞集落的孔數(shù)與空孔數(shù)。

通過所有孔數(shù)與細胞集落形成孔數(shù)之比，計算細胞集落形成率。
WAKO的產(chǎn)品介紹
【結(jié)果】
細胞接種數(shù)少時，添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細胞集落更多。

未分化人iPS細胞的維持確認(rèn)
【細胞株】人iPS細胞201B7株
【培養(yǎng)基】StemSure® hPSC培養(yǎng)基Δ+35 ng/mL bFGF
Red：rBC2LCN-635（人iPS細胞膜染色）
Blue：DAPI (細胞核染色)
※ BC2LCN是一種對存在與人ES/iPS細胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素
WAKO的產(chǎn)品介紹
【結(jié)果】
添加CEPT時與添加Y-27632時都未觀察到細胞形態(tài)的差異，均可確認(rèn)未分化維持狀態(tài)。

◆產(chǎn)品列表
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相關(guān)產(chǎn)品
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※ 僅供實驗研究用，不可用于臨床診斷。

 

 

 

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